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微滴式數字PCR平臺

來源: 時間:2022-01-23 12:48:57 點擊量:

  

  微滴式數字PCR (Droplet digital PCR, ddPCR) 是近年來發展起來的快速、準確、可實現DNA絕對定量的PCR方法。ddPCR在傳統的PCR擴增前對樣品進行微滴化處理,即將含有核酸分子的反應體系分成數萬個納升級的微滴,其中每個微滴或不含待檢核酸靶分子,或者含有一個至數個待檢核酸靶分子。經PCR擴增后,對每個微滴的熒光信號進行逐一分析,有熒光信號的微滴判讀為陽性,沒有熒光信號的微滴判讀為陰性,根據泊松分布原理及陽性微滴的個數與比例即可得出靶分子的起始拷貝數或濃度。ddPCR是做到真正意義上的絕對定量,數據分析更加客觀可靠。與qPCR方法相比,ddPCR兼有qPCR方法的優點,同時提高了檢測靈敏度,在復雜異質樣品中的稀有序列檢測方面具有明顯的技術優勢。ddPCR的另一個主要優勢是所需樣本量很低,尤其是當病理樣本太少時,這在臨床上具有特殊意義。

  ddPCR技術的引入為麻風患者尤其是少菌型麻風患者檢測帶來了希望。2021年11月我院接診1例少菌型麻風患者,該患者qPCR結果陰性,ddPCR檢測陽性,成功對患者確診。此次是ddPCR技術助力少菌型麻風臨床診斷的成功案例。

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